ドン・キホーテ葛西店の最大の強みは、ほぼ一日中いつでも買い物ができる柔軟な営業時間設定にあります。現在の基本営業時間は朝9:00から翌朝5:00となっており、実質20時間体制で営業を継続しています。
地域密着型店舗でありながら、早朝の通勤前や深夜の帰宅時、さらには緊急で日用品や薬品・工具等が必要になった際にも駆け込めるため、江戸川区内でも屈指の安心感を誇ります。かつて一部で「完全24時間営業になったのではないか」という噂も飛び交いましたが、朝5:00から9:00までの4時間は清掃・商品補充のための閉店時間となっている点には注意が必要です。
深夜時間帯（24:00〜翌4:00）は店内が比較的空いており、レジの待ち時間も少なくスムーズに買い物が可能です。ただし、一部の医薬品カウンターなど専門スタッフの常駐が必要なコーナーは深夜帯に受付を休止する場合があるため、特定の商品を狙う際は事前の確認をおすすめします。
