園遊会は皇室主催の極めて格式高い公式行事であるため、招待状には明確なドレスコード（服装基準）が記されています。男性・女性それぞれに伝統的な装いのルールが存在します。
男性の服装指定は、モーニングコート、紋付羽織袴（和服）、またはダークスーツです。昼間の最高格式であるモーニングコートを着用する政治家や官僚が多い一方、近年は仕立ての良いダークスーツでの出席も定着しています。
女性の服装指定は、訪問着や色留袖などの和服、またはデイドレス（アフタヌーンドレス）です。特に華やかな着物姿は新緑や紅葉の庭園に映えるため、多くの女性招待者や同伴配偶者が伝統的な和装を選びます。ただし、赤坂御苑は芝生や砂利道が広がる自然豊かな庭園です。草履やヒールで歩く際は、足元を取られないよう歩幅を小さく保つ配慮が求められます。
また、雨天時には傘を差しての移動となりますが、両陛下や他の招待者の視界を遮らないよう、透明なビニール傘が宮内庁から配給されるなど、細やかな配慮がなされています。両陛下からお声を掛けられた際は、過度にかしこまりすぎず、自然な敬意を込めた笑顔で言葉を交わすことが最高のマナーとされています。
