科学技術館サイエンスホールの総座席数は410席（車椅子スペース含む）。客席は前方から後方に向かってA列からT列まで並ぶ縦長かつすり鉢状のレイアウトです。「後方列でもステージが近く感じる」という評判の正体は、一般的な多目的ホールを凌駕する計算し尽くされた階段状の段差と傾斜角にあります。
多くの多目的ホールでは、展示会やフラットな利用を想定して前中盤の傾斜を緩やかに設計しがちですが、サイエンスホールは階段1段分ずつの明確な段差が列ごとに設けられています。これにより、前の座席に座る人の座高によってステージ中央がブラインドになる「被り問題」が構造的にほぼ発生しません。
「最後列であるT列を引いてしまい落胆したものの、着席した瞬間にステージ上の演者と目線がまっすぐ結ばれ、双眼鏡なしでも手の動きや口元の笑みがはっきりと確認できた」という参加者の声は数多く記録されています。ステージの横幅は約10.8メートル、客席最前列から最後列までの直線距離はおよそ20メートル前後に収まるため、ドームやアリーナクラスの会場とは比較にならない親密なスケール感が保たれています。
