広大な壁画（縦4.6メートル、横8.8メートル）に向き合った際、多くの人が最初に抱く疑問が「最後の晩餐 ユダ どれなのか」という初歩的かつ本質的な問いです。12人の使徒はイエスを中心に3人ずつ4つのグループに整然と分けられていますが、ユダが位置するのはイエスから見て右隣（鑑賞者から見てイエスの左側）に位置する第2グループです。
このグループは、若き「使徒ヨハネ」、激昂する「使徒ペテロ」、そして「イスカリオテのユダ」の3人で構成されています。最後の晩餐 ユダ 見分け方において、初見でも確実に見つけ出すための決定的な特徴は以下の4点に集約されます。
第一の特徴は、最後の晩餐 ユダ 位置における独特の姿勢です。隣に座るペテロが身を乗り出し、ヨハネが哀しみに項垂れるなか、ユダだけは背筋を強張らせ、後ろへ引くように身体をのけぞらせています。イエスの衝撃的な告発に対して、無実を訴えようと身を乗り出す他の弟子たちとは対照的に、図星を指された人間の防衛本能が如実に表現されているポイントです。
第二の特徴が、最後の晩餐 ユダ 顔 影の存在です。明暗法（キアロスクーロ）の巨匠であったダ・ヴィンチは、画面左側にある本物の窓から差し込む光の論理を絵画内に適用しました。しかし、ユダの顔だけは意図的に暗がりの中に沈められており、黒く濁った横顔として描かれています。この陰影表現こそ、内面に罪悪と不穏な企みを抱えた裏切り者を視覚化する劇的な仕掛けです。
第三と第四の特徴は、彼の手元にある象徴的な小道具です。これらはダ・ヴィンチが鑑賞者に提示した謎解きの鍵でもあります。
