殺伐とした裏稼業の世界に彩りと深みを与えたのが、情報収集や潜入を担った女性陣と、視聴者の怒りを極限まで引き出した悪役たちです。
歴代の必殺仕事人における女性キャスト一覧を紐解くと、何でも屋の加代を演じた鮎川いずみさんやお竜役の木の実ナナさん、主水の妻・りつ役の白木万理さんなど、多彩な顔ぶれが揃います。平成・令和版でも、小五郎の妻・ふく役の中越典子さん、義母・こう役の松尾諭さん（前任の野際陽子さんから継承）らがコミカルな日常パートを支えてきました。
また、仕事人の刃に倒れる必殺仕事人の歴代悪役キャストの存在も作品の完成度を左右する極めて重要な要素です。津川雅彦さん、石橋蓮司さん、西田健さん、中尾彬さんといった名優たちが演じる極悪非道な黒幕がいてこそ、制裁シーンのカタルシスが成立しました。かつて無名時代に悪役の下っ端として主水に斬られていた遠藤憲一さんが、後に仕事人（瓦屋の陣八郎）としてレギュラー入りを果たしたエピソードは、ファンの間で語り草となっています。
